上海一基實業(yè)有限公司是一家集經(jīng)銷批發(fā)、招商代理的有限責(zé)任公司,是一家經(jīng)國家相關(guān)部門批準注冊的企業(yè)。主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、生
物試劑、培養(yǎng)基、等產(chǎn)品,具體請.
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5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。
10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
【大鼠γ干擾素(IFN-γ)Elisa試劑盒樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。
【大鼠γ干擾素(IFN-γ)Elisa試劑盒注意事項】
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
2、酶標包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
5、本試劑盒定量范圍為62.5-2000ng/L,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結(jié)果(62.5-2000ng/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。
7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。
8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。
9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
【大鼠γ干擾素(IFN-γ)Elisa試劑盒操作程序總結(jié)】
準備試劑,樣品和標準品
加入準備好的樣品和標準品,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘
加入終止液
15分鐘之內(nèi)讀OD值
計算
【大鼠γ干擾素(IFN-γ)Elisa試劑盒檢測范圍】
62.5ng/L - 2000ng/L
【大鼠γ干擾素(IFN-γ)Elisa試劑盒規(guī)格】
96人份/盒
【大鼠γ干擾素(IFN-γ)Elisa試劑盒貯藏】
2-8℃,避光防潮保存。
【大鼠γ干擾素(IFN-γ)Elisa試劑盒有效期】
6個月