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產(chǎn)品分類產(chǎn)品中心/ products
產(chǎn)品型號(hào)：
更新時(shí)間：2024-11-19簡(jiǎn)要描述：產(chǎn)品說明本產(chǎn)品直接以血液為模板，用抗抑制的2×Direct PCR Master Mix 進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物直接通過電泳檢測(cè)。適用范圍1. EDTA、肝素、檸檬酸鈉抗凝方法保存的新鮮或冷凍血樣；2. 未加抗凝劑的血樣和干血；3. 血液基因組的擴(kuò)增檢測(cè)。
產(chǎn)品介紹
本試劑盒以血液為模板直接進(jìn)行DNA擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物可直接點(diǎn)樣電泳。該試劑盒中含有設(shè)計(jì)的Taq酶突變體，這些使它能夠耐受全血樣品中存在的抑制劑。在大多數(shù)抗凝劑存在下，包括肝素、檸檬酸和EDTA等，Taq酶依然擴(kuò)增性能良好。由于其可以從血液直接進(jìn)行擴(kuò)增，免除了繁瑣的DNA提取步驟，加快了工作流程，降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 簡(jiǎn)便：無需事先對(duì)血液進(jìn)行提純，直接用血液為模板擴(kuò)增目的基因；
2. 高效：多數(shù)抗凝劑存在條件下，*的抗抑制能力，能有效擴(kuò)增雜質(zhì)較多的模板。
產(chǎn)品用途
1.未加抗凝劑的血液樣本；
2.添加了肝素、檸檬酸、EDTA 等抗凝劑的血液樣本；
3.血液基因組擴(kuò)增檢測(cè)。
使用建議
1.使用時(shí)添加≤10%的全血為模板，若擴(kuò)增不出目的條帶， 酶量可加倍。加上血液后將管中各組分輕輕混勻。
2.2mM Mg2+可以滿足絕大多數(shù) PCR 擴(kuò)增，對(duì)于某些 PCR， 為了保證較好的擴(kuò)增，可調(diào)
節(jié)為 2-5mM。
保存溫度
-20℃保存。
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品組成 | 體積 |
2 × Direct Blood PCR Buffer （with Mg2+） | 1.25ml |
dNTPs（各 10mM） | 100μl |
Direct Taq DNA 聚合酶（400U） | 100μl |
常用反應(yīng)體系 (25μl):
2 × Direct Blood PCR Buffer （with Mg2+*） | 10μl |
上游引物 | 0.2-1.0 μM（終濃度） |
下游引物 | 0.2-1.0 μM （終濃度） |
dNTPs（各10mM） | 1μl |
全血 | 0.1-2.5μl |
Direct Taq DNA 聚合酶（400U） | 1μl |
ddH2O | 至 25 μl |
*Mg2+終濃度為 3.5mM
常用PCR設(shè)置
當(dāng)擴(kuò)增片段＜3K | 當(dāng)擴(kuò)增片≥（推薦引物長(zhǎng)度≥30bp） |
94℃， 1 分鐘 30 秒 94℃，20 秒 55-60℃，20 秒 30-40循環(huán) 72℃，1kb/60 秒 72℃ 5 分鐘 4℃ 保溫 | 94℃， 5 分鐘 94℃，15 秒 30-40循環(huán) 68℃，1kb/60 秒 72℃ 5 分鐘 4℃ 保溫 |
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